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pcr清潔試劑盒反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環。
如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，則會出現Smear。
◇Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間(預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性，因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度，進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時，時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產物；Anneal溫度太低時，容易發生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成；而Extension時間太長時，會出現Smear。
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