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聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳是以聚丙烯酰胺凝膠做支持物的一種區帶電泳,由于此種凝膠具有分子篩的性質,所以本法對樣品的分離作用,不僅決定于樣品中各組分所帶凈電荷的多少,也與分子的大小有關。其次,聚丙烯酰胺凝膠電泳還有一種獨特的濃縮效應,即在電泳開始階段,由于不連續pH 梯度的作用,將樣品壓縮成一條狹窄區帶,從而提高了分離效果。
聚丙烯酰胺凝膠具有網狀立體結構,很少帶有離子的側基,惰性好,電泳時,電滲作用小,幾乎無吸附作用,對熱穩定,呈透明狀,易于觀察結果。
聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺(簡稱Acr)和交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺(簡稱Bis)在催化劑的作用下,聚合交聯而成的含有酰胺基側鏈的脂肪族大分子化合物。
還要結合聚丙烯酰胺凝膠電泳三個不連續,即:凝膠孔徑不同、緩沖液pH不同、緩沖液離子成分不同
和三個效應:濃縮效應、電荷效應、分子篩效應來一起說
聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的電泳方法。在這種支持介質上可根據被分離物質分子大小和分子電荷多少來分離。 聚丙烯酰胺凝膠有以下幾大優點: 聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺和N,N'甲叉雙丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝膠有格子是帶有酰胺側鏈的碳-碳聚合物,沒有或很少帶有離子的側基,因而電滲作用比較小,不易和樣品相互作用。 由于聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成的物質,在聚合前可調節單體的濃度比,形成不同程度交鏈結構,其空隙度可在一個較廣的范圍內變化,可以根據要分離物質分子的大小,選擇合適的凝膠成分,使之既有適宜的空隙度,又有比較好的機械性質。一般說來,含聚丙烯酰胺7-7.5%的凝膠,機械性能適用于分離分子量范圍不1萬至100萬物質,1萬以下的蛋白質則采用含聚丙烯酰胺15-30%的凝膠,而分子量特別大的可采用含聚丙烯酰胺4%的凝膠,大孔膠易碎,小孔膠則難從管中取出,因此當丙烯酰胺的濃度增 加時可以減少雙含丙烯酰胺,以改進凝膠的機械性能。 在一定濃度范圍聚丙烯酰胺對熱穩定。凝膠無色透明,易觀察,可用檢測儀直接測定。 丙烯酰胺是比較純的化合物,可以精制,減少污染。合成聚丙烯酰胺凝膠的原料是丙烯酰胺和甲撐雙丙烯酰胺。丙烯酰胺稱單體,甲撐雙丙烯酰胺稱交聯劑,在水溶液中,單體和交聯劑通過自由基引發的聚合反應形成凝膠在聚丙烯酰胺凝膠形成的反應過程中,需要有催化劑參加,催化劑包括引發劑和另速劑兩部分。引發劑在凝膠形成中提供始自由基,通過自由基的傳遞,使聚丙烯酰胺成為自由基,發動聚合反應,加速劑則可加快引發劑放自由基的速度。 安徽賽科環保科技有限公司現有聚丙烯酰胺、絮凝劑系列,造紙分散劑,油田泥漿助劑等二十多個品種,品質均已達到國內先進水平,產品應用于城市污水,造紙工業,有色金屬冶煉,選礦,自來水工業,油田化工,紡織印染,制藥,皮革,食品等全方位領域。